固相支持物表面双链核酸的制备方法<%=id%>

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专利代理机构：南京经纬专利代理有限责任公司
代理人：沈廉
摘要
　固相支持物表面双链核酸的制备方法是基础分子生物学及生物医学领域中在固相支持物制备双链核酸的一种独特方法，运用这种方法制备连接双链核酸的固相支持物。该制备方法包括如下步骤：(a)化学合成两种单链寡核苷酸片段，其中一个为通用单链寡核苷酸片段，另外一个为探针单链寡核苷酸片段，(b)在液相反应体系中将该通用单链寡核苷酸片段与探针单链寡核苷酸复性并进行核酸连接酶连接反应，(c)将单分子核酸样品点样到表面被醛基修饰的固相支持物表面，经胺化的脱氧胸腺嘧啶核苷酸将单分子核酸连接在固相支持物表面；(d)寡核苷酸微阵列经核酸聚合酶延伸反应，填平固定的单分子核酸的单链寡核苷酸部分，在支持物表面合成完整的双链核酸分子。
主权项
　权利要求书 1、一种在固相支持物表面制备双链核酸的方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤： (a)化学合成两种单链寡核苷酸片段，其中一个为通用单链寡核苷酸片段，该单链寡核苷酸片段5＇端含有两段反向碱基互补序列，3＇端含有一段突出的单链寡核苷酸片段，在两段反向碱基互补序列中间间隔C6胺化的脱氧胸腺嘧啶核苷酸；另外一个为探针单链寡核苷酸片段，该单链寡核苷酸片段3＇端含有一段能够与通用单链寡核苷酸片段3＇端突出的单链寡核苷酸片段碱基完全互补的单链寡核苷酸片段； (b)在液相反应体系中将该通用单链寡核苷酸片段与探针单链寡核苷酸复性并进行核酸连接酶连接反应，从而形成在3＇端带有发卡结构的单分子核酸样品； (c)将单分子核酸样品点样到表面被醛基修饰的固相支持物表面，经胺化的脱氧胸腺嘧啶核苷酸将单分子核酸连接在固相支持物表面； (d)寡核苷酸微阵列经核酸聚合酶延伸反应，填平固定的单分子核酸的单链寡核苷酸部分，在支持物表面合成完整的双链核酸分子。

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