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| 所属分类： |
生物化学 |
项目来源： |
自创 |
| 技术持有方姓名： |
中国科学院福建物质结构研究所 |
所在地域： |
福建 |
| 是否中介： |
否 |
是否重点项目： |
否 |
技术简介：
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本发明涉及生物化学领域，特别是涉及一种蛋白质的简便分离纯化技术。PHA-E现已成商品作为生物化学试剂出售，目前Phamacfa公司出售的PHA-P采用Rigas，D.A等人的硫酸铵沉淀法，纯度只达85%。我国上海、广州也生产此试剂。面对对PHA-E，Phamacia公司采用Leavitt技术，先用亲和层析从菜豆中分离PHA混合物，接着用离子交换层析获得该产品。本发明的目的在于寻找一种简便的植物血球凝集素的分离纯化技术。本发明的技术方案是不经繁琐的硫酸铵沉淀步骤，它只包括盐溶液抽提和S-Sepharose Fast Flow（SSFF）强阳离子柱层析两个步骤。由本技术所得之产物冻干粉得率为150mg/kg种子。其冻干粉在Tris-HC1缓冲液和PEG4K条件下已经成功地长出晶体。 本发明与现有技术相比，具有下面积极效果：1、用于分离纯化植物血球凝集素的本技术，不经硫酸铵沉淀步骤，省却许多人工繁琐操作。且柱内填充物经简单处理可反复使用。2、本发明在粗提液后只用一根S-SFF柱只经一次梯度洗脱便可得到纯品，比Leavitt方法更简便，更省时省力。3、由本发明分离的植物血球凝集素纯度可用于生长晶体，在Tris-HC1缓冲和PEG4K等沉淀剂下得到八面体单晶，可用于X-射线衍射分析，同时使产品的纯度达到100%。PHA-E与其他药物配合，能治疗多种肿瘤和再生障碍性贫血。 |
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