提高用毕赤酵母分泌表达成纤维细胞生长因子表达量的方法<%=id%>

所属分类：	生物技术	项目来源：	自创
技术持有方姓名：	中国科学院长春应用化学研究所	所在地域：	吉林
是否中介：	否	是否重点项目：	否
技术简介：	该发明专利是一种提高毕赤酵母分泌表达成纤维细胞生长因子表达量的方法。该专利所使用的毕赤酵母工程菌为GS115或KM71；其分泌型表达载体为pPICZα-A，pHIL-S1，pPIC9，或pPIC9K。先将毕赤酵母工程菌在BMGY培养基中培养，再将菌体重悬于复合诱导培养基（BMMAY）开始诱导表达蛋白，BMMAY培养基的组成为：甲醇终浓度为0.5%-1.5%BMMY培养基，终浓度为0.05%-0.1%疏水性氨基酸丙氨酸（Ala ）缬氨酸（Val）、亮氨酸（Leu）、苯丙氨酸（Phe）、酪氨酸（Tyr）或蛋氨酸（Met）；诱导温度为：30-31℃诱导时间：72-144小时；每隔24小时补加诱导剂甲醇及氨基酸，达到诱导时间后离心收获上清液进行分离纯化。