以绿色荧光蛋白质来侦察Apoptosis的产生<%=id%>

所属分类：	生物技术	项目来源：	自创
技术持有方姓名：	HKUST RandD Corp Ltd	所在地域：	港澳台
是否中介：	否	是否重点项目：	否
技术简介：	这发明是利用FRET为基的分子探测器来侦察活细胞中细胞死亡程式的一个新方法。 Apoptosis是很多疾病中一个重要细胞进程。细胞死亡程式中一个很重要的步骤是要使一系列的内细胞蛋白质活跃起来，例如caspase-3。众caspases的基层物质通常是共用同一个已认同的利用遗传学工程技术，我们制造分子探测器并透过二种拥有DEVD基因密码排列的不同颜色的GFPs（绿色荧光蛋白质）来测定caspase-3的活动。当这些工程基因被带到细胞后，它的基因制品（一种可溶解的蛋白质）会变成caspase-3的基层物质，并能被蛋白质所分裂，只要改变这些基层物质的排列次序，我们便能设计类似的分子探测器来侦察不同蛋白质的活动。 GFP是一种天然的荧光蛋白质，它在水母"Aequorea Victoria"中被发现。当无性繁殖基因在非水母细胞中出现，这基因能产生内长的荧光蛋白质而不需要额外转变酵素和基层物质。在过去数年，在主细胞中GFP被广泛使用作为一种报告性基因。最近数种变异的GFP被制造出来以产生不同的刺激和放射光谱（即不同的荧光颜色）。这些变异提供了机会给荧光共振能量转移（FRET）技术去发展新的FRET分子探测器。当荧光送体分子位于非常接近受体分子（在100A内）的位置时，FRET便成为一种物理现象。在这情况下，若送体的放射波长和受体的刺激波长重叠，送体的荧光能量便能转移到受体。所以若送体受到刺激，荧光便从受体放射出来。在这发现中，我们用了蓝绿色（CFP）的GFP送体分子和*（YFP）的GFP受体分子。这两种蛋白由一种包含caspase-3基层物质的短缩氨酸连在一起。由于这两种GPF分子被连在一起，FRET的现象便可发生。即是说当送体分子被430nm波长的光源所刺激，能量便能转移到受体分子并使其激发出530nm荧光光线。这样的FRET现象便能用于侦察caspases的活动。当细胞进入Apoptosis的程序，caspase便活跃起来。活跃的caspase会分裂这两种被缩氨酸基层物质所连在一起的GFP分子。当这两种GFP分子被分隔，FRET便不能发生。所以当送体分子受刺激时受体分子也不能射出光线。这个荧光物质的转变可被不同的视光装置侦察出来（如荧光显微镜，荧光碟子阅读器，活动荧光细胞分隔器或光谱荧光计），从而分析细胞是否正在经历Apoptosis的程度。由于细胞死亡程式在从多严重疾病中扮演一个重要角色，如不同类形的癌症，爱滋病，免疫力疾病等。药物若能使细胞死亡程式中的细胞失灵，这些严重疾病或可被控制。这发明在制药业中的快速测试药物方面有着很大帮助。这发明能快速侦察早期受物质诱发的细胞死亡程式。这方法能在各科学学院和制药业中广泛应用于各种研究工作上。这侦察程序极为简单。因这探测器是基因制品，其细胞中的工程基因会自动执行侦察的工作，而不需要特别程序去注射侦察器入细胞中。再者这发明能侦察个别活细胞的死亡程式。这方法对大规模测试药物来促进或阻碍细胞死亡程式的发展有着很大帮助。

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