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| 所属分类： |
生物技术 |
项目来源： |
自创 |
| 技术持有方姓名： |
HKUST RandD Corp Ltd |
所在地域： |
港澳台 |
| 是否中介： |
否 |
是否重点项目： |
否 |
技术简介：
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cdc2型二乙基溴乙酰胺激酶（Nclk）涉及到二乙基溴乙酰胺的区分和神经细胞骨架动力的调节。激酶由催化子单元、Cdk5和从一种特别包含35kDa二乙基溴乙酰胺的蛋白质（P25nck5a）中提取的25kDa(p25nck5a)催化蛋白质组成。我们利用（酉孝）母双重杂交系来筛选与p35nck5a有关的蛋白质。在阳性克隆中，有三个全新的克隆的cDNA顺序。利用这些全新的cDNA顺序作为探针，可以把鼠脑中全部cDNA中的与新的p35相关的蛋白质的全长顺序分离出来，并利用亲和力折叠化验的方法来显示它与p35nck5a互动反应。这些全新蛋白质的全长形式，分别称为C42，C48，C53，它们的分子重量分别为66，24，57kDa。进一步的分析显示出，这些全新的蛋白质广泛分布于各种人体组织中，包括心脏，大脑，骨骼，肌肉，胎盘，肺，肝脏，肾脏，和胰腺。在这三种蛋白质中，只有C48和C53可被Nclk磷酸化，这显示出它们可能是Nclk的培养基。与这些全长顺序相关的异体同形研究显示出，C48可能与最新发现的一种叫restin的媒质丝蛋白有关。但是，除了得到一些顺序标记表达（EST）外，对C53的研究并未有发现到它与任何已知蛋白质有任何联系。与之相反，对C42克隆的顺序研究显示出，它具有与人体内的C.elegans和A.thaliana同质的基因，因此，蛋白质在进化过程中得以保存，有趣的是，用催化剂对C42蛋白质进行预先孵化时，对Nclk的活动性表现出较强抑制力的是C42全长蛋白质，而不是（酉孝）母双重杂交粘合碎片。
象C42这样对Nclk具有强抑制力的一种新型蛋白质，有可能成为用p35nck5a来研究Cdk5的反应机理的有用工具。而且这一潜在的抑制剂可直接用来描述Nclk产生效力所需通过的信号转换的路径。从长远来看，对C42蛋白质结构的研究可为研制调节Nclk与细胞活动性的新药提供有力的依据。
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