技术简介：
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一、技术简介：
IL-3和TPO均可以促进造血干细胞向血小板的分化,提高血小板的水平。IL-3主要作用在造血干细胞分化的前期阶段,TPO作用于造血细胞分化、成熟至血小板形成的整个过程,尤其是中后期阶段。IL-3和TPO的融合蛋白临床上的应用效果将比IL-3和TPO两种因子的联合使用更具优势,药效高,而且副作用大大减低,据专家预测,这种创新的生物制品在国内和国际市场上将具有很大的潜力。
二、技术分析：
该项目运用基因工程技术,采用高保真PCR将人IL-3和TPO扩增出来,将这两个基因融合在一起,再克隆到高效表达的载体上,然后转移到一个稳定的菌株里,以高效地生产重组融合蛋白。
接着进行小试生产,并研究、摸索出一个经济有效的重组蛋白纯化路线,然后对纯化后的重组蛋白进行生物活性的检测和临床前的动物学试验,研制出的IL-3和TPO融合蛋白属于一类新药。本项目的主持人在美国时曾对IL-3和TPO进行了系统的研究,并克隆出中国人的TPO基因,回国后对TPO和IL-3进行了进一步的研究,已经初步研究出融合蛋白的表达载体,以上技术路线中所采用的技术,绝大多数具有国际先进水平,其他的是国内先进水平。
三、项目进展情况和技术的成熟程度：
1、我们已经完整地建立起该项目所需的分子生物学实验室,配备了PCR、酶标仪等所需的仪器设备,熟练掌握了有关技术。
2、通过一年的努力,已经成功地克隆出中国人的IL-3、TPO基因,通过测序来验证获取的IL-3、TPO基因是完全正确的,并将其融合,然后克隆到高效表达的载体上。
3、我们已经找到了可以稳定高效表达该融合蛋白的菌株并将融合基因的载体转移到稳定表达的菌株上。
4、我们已摸索出实验室小试的条件和蛋白表达、分离纯化工艺。
下一步的主要是准备进行中试和产业化开发研究,以及药理药效研究,新药申报等工作。 |
