荧光法检测HBV-YMDD基因突变---拉咪呋定治疗HBV感染病例入选和疗效估计的重要指标<%=id%>

所属分类：	医疗卫生	项目来源：	其他
技术持有方姓名：	朱彪	所在地域：	浙江
是否中介：	否	是否重点项目：	否
技术简介：	肝炎病毒、艾滋病毒和MRSA感染为世界上三大感染难题。中国为乙肝病毒（HBV）感染大国，全国感染人数高达1.2亿。因乙肝病毒感染易慢性化，可引起肝硬化甚至肝癌，因此人们在不断探索新的治疗方法来改善HBV感染的预后。拉米夫定抗HBV治疗是继干扰素治疗后一种新的抗HBV疗法，现在临床上已广泛使用，治疗有效者HBV复制可受到很大程度的抑制，患者清转氨酶稳定，临床症状明显改善。但拉米夫定抗HBV只对野生株（YMDD型）有效，对变异株（YVDD型、YIDD型）无抑制作用。文献报道，用限制性内切酶对拉米夫定治疗前后HBV-YMDD基因突变进行分析发现，拉米夫定治疗前HBV-YMDD变异为24%（33/137），治疗1年后，变异率为32.4%(12/37),治疗18个月,变异率为56.3%(9/16),治疗二年后,变异率为66.7%(8/12)。可见，在拉米夫定治疗前后，都存在HBV-YMDD基因的变异，随着拉米夫定治疗时间的延长，HBV-YMDD变异株的出现率越高。因此，在拉米夫定治疗HBV感染时，及时检测HBV-YMDD对治疗病例的选择和疗效估计有重要意义。目前国内外用于HBV-YMDD突变检测的方法主要有二种，一种是序列直接测定法，虽可明确诊断YMDD变异，但耗时长费用大（每测一例约需成本80元人民币）；另一为酶切法，此法需在常规PCR的基础上，进行PCR产物酶切消化，再对消化产物进行PAGE电泳，且有时酶切产物片段过短，分析的敏感性不高。因此研究和开发一种高效、快速、经济的HBV-YMDD变异检测法，已迫在眉间。本研究用美国Roche公司生产的全自动荧光定量PCR仪（全省各大医院和科研单位基本上已配备或正在配备），采用荧光标记探针技术对HBV-YMDD进行快速测定，预计30—40分钟就可以测出32例病人的YMDD变异情况（每例测定成本少于15元人民币）此研究方法的开发和应用，必定能提高临床拉米夫定治疗HBV的有效率，避免盲目用药带来的我国本已紧缺的宝贵医疗资源的巨大浪费，造福病人。

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