利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法<%=id%>

利事务所. 代.. 理.. 人：. 毛翠莹
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. 摘要　.
.本发明涉及一种利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法，在优化的培养基和培养条件下，利用促生拮抗菌M18的衍生菌株M18G和M18R，分别生产出高含量吩嗪-1-羧酸和藤黄绿菌素的发酵液，再分别将M18G发酵液和M18R 发酵液制备成干粉，并以M18G干粉中的吩嗪-1-羧酸和M18R干粉中的藤黄绿菌素的重量百分比为90％～10％和10％～90％进行物理复配，制备成高效防治植物病害的微生物源杀菌剂。与现有技术相比，本发明提供的杀菌剂是以微生物代谢产物为活性成分的可湿性粉剂而非活菌制剂，因而具有高稳定性，其药效不易受环境条件的影响，同时在低剂量使用的前提下，对植物的多种病害具有更高的防治效果。
. 主权项　.
.1、一种利用促生拮抗菌M18衍生菌株制备杀菌剂的方法，其特征在于包括如下步骤： 1)将M18G菌株接种在甘油培养基的平板上，在26～30℃下活化生长20～24 小时，然后将活化的M18G菌株转接到含有甘油培养液的三角瓶中放大，在 26～30℃的摇床中振荡培养10～14小时，摇床转速为210～230转/分；然后继续转接2～3次，在甘油培养液中进行多级放大发酵培养；最后转接到葡萄糖培养液中进行放大发酵培养，温度和转速不变，发酵时间为70～ 74小时，得到吩嗪-1-羧酸含量为1500～1700毫克/升的M18G菌株发酵液；其中，所述甘油培养基和甘油培养液中含有的组分重量百分比为：蛋白胨 1.8～2.2％、甘油1.3～1.7％、硫酸镁0.05～0.1％、磷酸二氢钾0.01～ 0.05％、pH6.8～7.2；所述葡萄糖培养液的组分重量百分比为：黄豆粉 4.5～5.5％、葡萄糖3.8～4.2％、豆油0.3～0.5％、尿素0.1～0.3％、余量为水，pH6.8～7.2； 2)将M18R菌株接种在甘油培养基的平板上，在26～30℃下活化生长18至 24小时；然后将活化的M18R菌株转接到含有甘油培养液的三角瓶中放大，在26～30℃的摇床中振荡培养10～14小时，摇床转速为230～250转/分；然后继续转接3～4次，在甘油培养液中进行多级放大发酵培养，最后一级的发酵时间为68～72小时，温度和转速不变，得到藤黄绿菌素含量为750～ 850毫克/升的M18R菌株发酵液；其中，所述的甘油培养基和甘油培养液中含有的组分重量百分比与步骤1中所述相同； 3)分别将M18G菌株发酵液和M18R菌株发酵液，干燥成粉，制备成M18G干粉和M18R干粉； 4)将M18G干粉和M18R干粉混合，制成可湿性粉剂，即为杀菌剂，其中，M18G 干粉中的吩嗪-1-羧酸和M18R干粉中的藤黄绿菌素的重量百分比分别为90 ％～10％和10％～90％。.
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