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的是提供一种能够高效、准确地提取生物体特殊部位基因的方法。本发明技术方案是:一种克隆基因的方法,是自被固定在石蜡切片中的生物材料中分离基因,克隆基因。具体地说,该方法是以被固定在石蜡切片材料中的mRNA为模版,在载玻片上进行原位反转录,然后利用PCR技术扩增反转录产物,克隆基因。为了达到理想的效果,对所利用的石蜡切片应进行前处理,包括脱蜡、用蛋白酶处理和基因组DNA的酶解。为了使提取的效果更好,原位反转录后,PCR扩增前,在切片上对反转录产物进行加尾反应。本发明的方法在构建cDNA文库中将得到广泛的应用。
主权项
权利要求书
1、一种克隆基因的方法,其特征在于:是自被固定在石蜡切片中的生物材料中
分离基因,克隆基因。
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