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本发明公开了鉴定识别任何给定靶位点的锌指结构域的体内筛选方法。也公开了识别特定位点的锌指结构域的氨基酸序列。
主权项
权利要求书
1.一种鉴定识别DNA上靶位点的锌指结构域的方法，该方法包括：
(a)提供包含报道构建体的细胞，所述构建体包含与启动子可操作连
接的报道基因，其中当转录因子识别启动子的募集位点和靶位点两者时
报道基因表达高于给定水平，但是当转录因子只识别启动子的募集位点
时则不这样；
(b)提供多个杂合核酸，其中每一个编码包含(i)转录激活结构域，
(ii)识别募集位点的DNA结合结构域，和(iii)试验锌指结构域的非天
然存在的蛋白质，其中编码的试验锌指结构域的氨基酸序列在所述多个
杂合核酸的成员间各不相同；
(c)在使得所述多个杂合核酸中的至少一个进入至少一个细胞的条件
下使所述多个杂合核酸接触所述细胞；
(d)在使杂合核酸在所述细胞中表达的条件下保持所述细胞；和
(e)鉴定含有(b)的杂合核酸并且报道基因表达高于给定水平的细
胞，报道基因表达高于给定水平是细胞包含编码识别靶位点的试验锌指
结构域的杂合核酸的指征。
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