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C12P19/34;C12Q1/68;C12Q1/42
颁 证 日：
优 先 权：
1999.9.22 US 09/404,258
申请(专利权)人：
锦可贝基因技术公司
地 址：
美国马里兰州
发 明 (设计)人：
杨淑伟
国 际 申 请：
CT/US00/26107 2000.9.22
国 际 公 布：
WO01/21813 英 2001.3.29
进入国家日期：
2002.05.21
专利 代理 机构：
广州三环专利代理有限公司
代 理 人：
温旭
摘要
在合成多核苷酸中，通过保护寡核苷酸3′末端，然后用其作为引物可提高合成多聚核苷酸的灵敏度和特异性。保护多聚核苷酸的3′末端可以阻止非特异性的链延长。然后温度提高时在热稳定酶作用下去除阻断基团，从而进行模板特异性的多聚核苷酸合成。该发明同时也提供了3′末端带有阻断基团的寡核苷酸以及在高温下可去除阻断基团的热稳定酶。该发明中的组分及方法在多种DNA/RNA扩增和分析技术中非常有用，包括医学遗传研究、诊断，病原体检测，法医，及动植物遗传应用等。
主权项
权利要求书
1.在已有的多聚核苷酸序列分子3′羟基末端增加一个核苷的方法，包括：
(A)把可能含有目的多聚核苷酸分子的样品与反应混合物混合，反应混合物
包括：
(1)与既定目的多聚核苷酸分子配对的引物，引物的3′羟基末端受基团
保护，阻止链延伸；
(2)热稳定基团去除酶(TBGRE)；
(3)一个热稳定多聚核苷酸聚合酶；
(4)至少一种5′核苷三磷酸以及
(B)混合物温度提高至高于38℃时，产生的引物延伸产物。
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