重组人快速骨骼肌型肌钙蛋白C在大肠杆菌中的表达及其在抗肿瘤治疗中的应用<%=id%>

;C12N15/12;C12N1/21;C12P21/00;A61K38/00;A61P35/00
颁证日：
优先权：
申请(专利权)人：重庆康尔威药业股份有限公司
地址： 400060重庆市南坪南城大道4号5楼
发明 (设计)人：周益群;刘先俊
国际申请：
国际公布：
进入国家日期：
专利代理机构：北京华科联合专利事务所
代理人：王为
摘要
　本发明涉及一种人肌钙蛋白C(TnC)的表达、纯化以及应用该蛋白作为抗血管生成药物的方法。采用PCR方法，从人乳腺cDNA文库中获得人肌钙蛋白C的编码序列，构建了含有该编码序列的大肠杆菌表达质粒，pET3b-TnC及其转化的大肠杆菌工程菌株E.coli BL21(DE3)pLy /pET3b-TnC，并利用此工程菌表达生产具有生物活性的人肌钙蛋白C。本系统具有呈可溶性表达、表达水平高、纯化工艺简单、产品纯度高、易扩大生产和成本低的特点。由本发明新生产的重组人肌钙蛋白C经体外细胞培养实验和动物实验均证明具有明显的抑制血管内皮细胞增殖和抑制肿瘤生长的生物活性，可作为一种抗血管生成药物用于实体肿瘤等的治疗。
主权项
　权利要求书 1.一种重组质粒pET3b-TnC，其特征在于，对从人乳腺cDNA文库中获得人肌钙蛋白C的编码DNA序列，分别在其5’端导入和克隆用内切酶NdeI识别序列 (内含起始密码ATG)，在其3’末端添加6聚组氨酸的编码序列、终止密码TAA 和内切酶BamHI识别序列。

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