利用多菌种联合厌氧发酵生产秸秆蛋白饲料的方法

nbsp;      址： 300222天津市河西区大沽南路1038号
发明 (设计)人：丁友昉;杜连祥;王德培;路福平国际申请：
国际公布：   进入国家日期：
专利代理机构：   天津市学苑有限责任专利代理事务所代   理   人：李明

摘要　
利用多菌种联合厌氧发酵生产秸秆蛋白饲料的方法，属于多菌种联合厌氧发酵生产秸秆蛋白饲料领域。本发明解决了秸秆等农作物资源利用率低的问题；提供了提高秸秆饲料蛋白质含量和动物采食率、预防动物肠胃病的饲料。它选用双氮纤维单胞菌、产黄纤维单胞菌、凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、淀粉乳杆菌、复合酶菌、丙酸菌、郎可比假丝酵母、拟内孢霉为菌源，利用现代生物技术，发酵液采用真空冷冻干燥制备菌粉，再与农作物秸秆及其它农副产物厌氧发酵制得牛、羊、猪、鱼、鸡或其它家禽的高蛋白饲料。本发明为畜牧业的大力发展、解决蛋白饲料不足、缓解人畜争粮的矛盾，提供了有效途径，同时减少了环境污染，具有重大的经济效益和社会效益。
主权项　
1.利用多菌种联合厌氧发酵生产秸秆蛋白饲料的方法，其特征在于：采用新型多菌种发酵剂，该发酵剂的制备工艺采用五类菌，共10株菌，分别培养；发酵液离心后采用真空冷冻干燥来制备菌粉粉剂；对农作物秸秆及部分副产物在厌氧条件下进行联合发酵，生产蛋白饲料；具体包括以下步骤： (一)制备新型秸秆发酵剂： 1)选用如下的微生物菌种作为菌源：双氮纤维单胞菌A1；产黄纤维单胞菌A2；凝结芽孢杆菌B1；嗜酸乳杆菌B2；枯草芽孢杆菌C1；淀粉乳杆菌 C2；复合酶菌D1；丙酸菌D2；郎可比假丝酵母E1；拟内孢霉E2； 2)秸秆发酵剂的制备工艺如下：斜面菌种→液体菌种→一级液体培养→二级液体培养→-液体培养→发酵罐发酵→离心→真空冷冻干燥→粉碎→将：双氮纤维单胞菌A1；产黄纤维单胞菌A2；凝结芽孢杆菌B1；嗜酸乳杆菌B2；枯草芽孢杆菌C1；淀粉乳杆菌C2；复合酶菌D1；丙酸菌D2；郎可比假丝酵母E1；拟内孢霉E2十种菌粉混合均匀→制成多菌种秸秆发酵剂；其具体的制备工艺如下： (1)斜面菌种：双氮纤维单胞菌A1；产黄纤维单胞菌A2；斜面保存使用稻草粉琼脂培养基，液体培养与发酵使用蛋白胨1％，葡萄糖1％，酵母膏0.5％，pH值7.0的培养基；凝结芽孢杆菌B1斜面保存和液体培养与发酵使用酵母膏1％，蛋白胨1％，葡萄糖0.6％，磷酸氢二钾0.2％，硫酸镁0.1％的培养基；嗜酸乳杆菌B2菌种保存使用10％奶粉培养基，液体培养与发酵使用牛肉膏1％，蛋白胨1％，葡萄糖2％，酵母膏0.5％，奶粉1％的培养基；枯草芽孢杆菌C1；淀粉乳杆菌C2；复合酶菌D1斜面保存和液体培养与发酵都使用肉汤培养基；丙酸菌D2斜面保存和液体培养与发酵都使用蛋白胨1％，酵母膏1％，蔗糖2％，磷酸铵0.5％的培养基；郎可比假丝酵母E1；拟内孢霉E2斜面保存使用10％麦芽汁培养基，液体培养与发酵使用蛋白胨2％，酵母膏，葡萄糖2％；所有的斜面菌种在28～30℃条件下静止培养20～24小时后，放入4℃冰箱中保存。 (2)液体菌种和一级液体培养：挑取2环于相应的培养基中，在28～30℃条件下摇床培养20～24小时；再于相应的培养基中进行接种量为5～10％的接种，在28～30℃条件下摇床培养20～24小时，进行一级液体培养； (3)二级液体培养：于相应的培养基中进行接种量为5～10％的接种，在28～30℃条件下摇床培养20～24小时，进行二级液体培养； (4)-液体培养：于相应的培养基中进行接种量为5～10％的接种，在28～30℃条件下摇床培养20～24小时，进行-液体培养； (5)发酵罐发酵：于相应的培养基中进行接种量为5～10％的接种，在28～30℃条件下摇床培养20～24小时，进行液体培养发酵； (6)离心、真空冷冻干燥及粉碎：将发酵液直接导入离心机进行离心后在进真空冷冻干燥机中进行处理，至最终含水量在3％。然后进行粉碎； (7)混合：将上述十种菌粉混合，即为发酵剂； (二)利用多菌种联合厌氧发酵生产秸秆及其它农副产物蛋白饲料：将农作物秸秆及其它农副产物铡锻成3～5cm或粉碎成20筛目的秸秆粉，每一吨添加一包混合好的发酵剂3g，农作物秸秆与水的混合比例为1∶0.5～1，混合均匀后，在7～40℃厌氧条件下进行发酵，35～7天即可制得蛋白质含量为10～30％的适用于牛、羊、猪、鱼、鸡、或其它家禽的蛋白饲料，其中鱼蛋白饲料为颗粒状。

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