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用酚/氯仿法提取动物基因组dna中,酚、氯仿、异戊醇的作用分别是什么?

来源:N       更新时间:2010-2-25
 
用酚/氯仿法提取动物基因组dna中,酚、氯仿、异戊醇的作用分别是什么?

 

酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚:氯仿:异戊醇=25:24:1的主要作用是抽提蛋白质

 

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酚是蛋白质变性剂,通过使蛋白质变性,从而使核蛋白中的核酸解离出来。另外,酚形成的有机相也可破坏蛋白质的胶体稳定性,从而蛋白质不会分布在水相中,避免了对核酸的污染。
氯仿也有是蛋白质变性的作用,但是在此组合中,它的作用主要是去除溶液中的酚。
异戊醇的作用是防止震荡出现的泡沫。
三者组合的比例常为25:24:1

 

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